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Plateforme d'évaluation des neutrophiles

Objectif de l'étude

Ce projet vise à développer et à utiliser une plateforme permettant d’évaluer le dysfonctionnement des neutrophiles dans l’EM/SFC.

Investigateurs

  • Vanessa Velasco
  • Ronald Davis, PhD

Mises à jour et perspectives

  • La plateforme d’évaluation des neutrophiles a été conçue et testée. Nous avons réussi à isoler les neutrophiles à partir d’échantillons de sang de contrôle sain non traités. Avec ce dispositif, nous comparerons le comportement des neutrophiles des EM/SFC et des contrôles en bonne santé lors d’un événement inflammatoire et évaluerons si les neutrophiles dans l’EM sont dysfonctionnels.
  • Avant un événement inflammatoire (EM=3, contrôles=3) : Les neutrophiles ont été surveillés pendant 3 heures et évalués toutes les 90 s. Les patients EM présentent des moyennes plus élevées de neutrophiles morts et apoptotiques entre 0,25 et 2,5 heures. Des populations mortes plus élevées sont observées jusqu’à 3 heures, mais les neutrophiles des personnes avec l’EM en apoptose sont au même niveau que les témoins à t=2,5-3 heures. Les neutrophiles des patients EM ont des populations de ROS légèrement inférieures pour t=0-0,5 h, puis de t= 0,5-2 h ils indiquent des populations de ROS plus élevées. Après t=2h, la population de ROS diminue en dessous de la moyenne des contrôles. Les neutrophiles EM migrent à des vitesses moyennes plus faibles, sur des distances plus courtes, avec des déplacements et des durées de mouvement plus faibles.
Hypothèse et description de l'étude

Le dysfonctionnement des neutrophiles est associé aux pathologies inflammatoires chroniques. Dans l’EM/SFC, un petit nombre d’études sur les neutrophiles indiquent une augmentation de l’apoptose précoce, une réduction des espèces réactives de l’oxygène (ROS), une régulation à la hausse d’un peptide de granule cytotoxique émis pendant les attaques de neutrophiles, et une diminution de la protéine de surface CD177, vitale pour la migration des neutrophiles et les activités d’élimination des bactéries. Pourtant, les caractéristiques des neutrophiles et les sources possibles d’inflammation, y compris la migration anormale et les attaques de l’hôte telles que les pièges extracellulaires des neutrophiles (NETosis), restent inexplorées.

Nous proposons d’élargir les connaissances actuelles sur le dysfonctionnement des neutrophiles dans l’EM/SFC. Ainsi, nous effectuerons une analyse multiparamétrique évaluant l’apoptose, la migration, les ROS et la NETose dans les populations de neutrophiles avant et après l’inflammation afin de découvrir une signature unique de la maladie et de fournir des informations indispensables sur les mécanismes de l’inflammation dans l’EM/SFC.

OBJECTIFS

Préparation pour une prise de sang. Belle jeune femme médecin africaine en uniforme médical blanc prête à prélever un échantillon de sang dans la veine du patient

  1. Développer et mettre en œuvre une plateforme d’évaluation des neutrophiles qui facilite l’isolement des neutrophiles à partir du sang total du patient et qui simule artificiellement un événement inflammatoire.
  2. Avant et après un épisode d’inflammation, comparer les caractéristiques des neutrophiles de patients atteints d’EM/SFC et de patients en bonne santé notamment l’apoptose, la migration, les espèces réactives de l’oxygène (ROS) et les pièges extracellulaires des neutrophiles (NETs).
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NMR Metabolomics
NMR (Nuclear Magnetic Resonance) is an instrument/tool used to perform metabolic studies, metabolic profiling, and metabolomics in biofluids and tissues for more than 40 years using magnetic fields. There is a very close connection between metabolic measurements and NMR. This connection has flourished because of NMR’s many unique strengths for characterizing complex mixtures’ chemical composition.
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Métabolomique est une façon d'étudier le métabolisme, c'est-à-dire de mesurer les quantités de métabolites (petites molécules) produites par notre corps lorsque nous transformons les aliments en énergie et autres molécules dont nos cellules ont besoin pour survivre. La technologie métabolomique est "à grande échelle", ce qui signifie que plusieurs milliers de métabolites peuvent être mesurés à partir d'un seul échantillon, par exemple de sang ou d'urine.

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